1 材料與方法
5427R 型 低 溫 離 心 機(jī) , 德 國 Eppendorf 公司;QL901 型渦旋振蕩器,江蘇海門其林貝爾公司;85300 型 TissueLyser II 組織研磨機(jī), 德國 QIAGEN 公司。用經(jīng)典 Hulth 法造模。用 3%戊巴 比妥鈉(30 mg·kg-1)腹腔注射麻醉大鼠,仰臥于手術(shù) 臺(tái)上,固定,右膝關(guān)節(jié)局部脫毛,備皮,消毒,鋪 巾,嚴(yán)格按照無菌操作。取大鼠膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)長(zhǎng)約 1 cm 的縱行切口,探查關(guān)節(jié)腔內(nèi)無原發(fā)疾病后,切 斷前交叉韌帶和完整切除內(nèi)側(cè)半月板,徹底止血, 沖洗關(guān)節(jié)腔,行抽屜試驗(yàn)陽性后,逐層縫合。術(shù)后 1 周,每天強(qiáng)迫動(dòng)物活動(dòng) 30 min,分 2 次驅(qū)趕,6 周 后即可獲得穩(wěn)定的骨關(guān)節(jié)炎大鼠模型。
2 結(jié)果
繼續(xù)篩選差異明顯的基因(|log2A/B|≥3,Q 值< 0.001),表達(dá)量>10 為表達(dá)明顯基因。結(jié)果獲得 8 個(gè)上調(diào)基因、12 個(gè)下調(diào)基因,具體基因名稱、基 因 ID。上調(diào)基因分別是 Ckm、 Tnni2、 Myh4、 Myl1、 Mylpf、 LOC100362027、 Casq1、Actn3。根據(jù) GO Biological Process 基因庫信 息,LOC100362027 主要參與核糖體組成,與蛋白質(zhì) 的合成有關(guān);Myl1、Mylpf、Tnni2、Casq1 等主要調(diào) 節(jié)肌肉收縮;Actn3、Myh4 可以調(diào)節(jié)肌肉的發(fā)育,促 進(jìn)骨骼肌的發(fā)展,Actn3 更可以調(diào)節(jié)骨形態(tài)的發(fā)生, 促進(jìn)骨礦化和骨成熟。
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