試劑與儀器

抗 P-選擇素單克隆抗體 SZ-2、SZ-51 由蘇州大學(xué)醫(yī) 學(xué)院阮長耿教授饋贈; 鈣離子載體 A23187( 分子式: C112H132CaMgN8O24) ，GM6001( 分子式: C20H28N4O4) ，環(huán) 孢菌素 A( cyclosporin A，CsA) ( 分子式: C62H111N11O12) 均 購自美國 Sigma 公司; FITC 標(biāo)記的羊抗小鼠 IgG 二 抗購自美國 Santa Cruz 公司; Ttramethylrhodamineethyl ester ( TMＲE) ( 分子式: C26H27ClN2O7) 購自 奧地利 Bender Medsystem 公司。低速離心機為中國 安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。電熱恒溫水 浴鍋為中國上海精宏實驗設(shè)備有限公司產(chǎn)品。全自 動三分類血液分析儀購自日本 Sysmex 公司。四維 旋轉(zhuǎn)混合儀購自中國江蘇海門市其林貝爾儀器制造 有限公司。流式細胞儀購自美國 Beckman-Coulter 公司。

結(jié) 果

可明顯促進血小板 線粒體膜電位的去極化( r = 0． 99)，并且同 時促進 GPIbα 的酶切( r = 0． 99)，但不會影 響血小板活化指標(biāo) P-選擇素的表達。這提 示，線粒體可能是血小板酶切重要的調(diào)控位點，而 CCCP 不引起血小板 P-選擇素的表達，即不引起血 小板活化的發(fā)生，這提示血小板酶切和活化是相對 獨立的信號通路。GPIbα 受體上酶 切的位點高度保守，ADAM17 酶切 GPIbα 的位點位 于 GPIbα 胞外近膜端 Gly464 和 Val465 之間，可能 通過調(diào)控 ADAM17 的酶切活性和調(diào)控 ADAM17 作 用底物的結(jié)構(gòu)兩種方式，單獨或協(xié)同調(diào)控細胞膜受 體的胞外端的酶切程度。但是目前血小板內(nèi)調(diào)控 ADAM17 的信號途徑還不清楚，線粒體功能與血小 板受體酶切之前的關(guān)系還未有報道。

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